La Diphotérine® es no tóxica (LD50 > 2.000 mg/kg oral/ dérmico agudo, obtenidos en experiencias animales). No se ha descrito ninguna toxicidad en la utilización en el hombre en lugares de trabajo a pesar de que el fabricante haya instaurado un programa de fármaco vigilancia.

No se ha detectado ningún efecto mutágeno en la prueba de Ames.
La Diphotérine® en sí y sus residuos de reacción con un ácido fuerte o una base, no resultan irritantes para los ojos del conejo. Tampoco resulta irritante para los ojos sanos del humano. No se ha descrito ningún efecto dañino en su uso tras accidentes de trabajo en medios industriales. En el conejillo de indias, la Diphotérine® no ha mostrado carácter sensibilizante cutáneo.
Se ha demostrado con pruebas de ecotoxicidad que la Diphotérine® no resulta tóxica sobre organismos estándar.

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